Морфология эритроцитов у здоровых поросят и поросят-гипотрофиков

Оснащение: микроскопы (15); термостаты (2); шлифованные стекла (30); предметные стекла (30); ножницы (2); пробирки (12); краска Романовского-Гимзы (100 мл); метиловый спирт (60 мл); гепарин (5000 ЕД в
1 мл) (1 мл); кедровое масло (10 мл); подопытные животные: здоровые поросята, поросята-гипотрофики или готовые мазки крови от поросят гипотрофиков.

Постановка опыта. В день занятий берут кровь от шести здоровых поросят (5-недельного возраста) и шести поросят-гипотрофиков того же возраста, стабилизируют ее гепарином и используют для получения мазков с целью изучения морфологии эритроцитов. При этом учитывают, что поросята-гипотрофики с низким уровнем физиологической зрелости всегда страдают апластической анемией.

Из доставленных проб крови студенты изготавливают мазки. Для этого стеклянной палочкой каплю крови наносят на предметное стекло, отступив на 1-1,5 см от его узкого края. Пальцами левой руки удерживают стекло за длинные ребра. В правую руку берут шлифованное стекло, подводят его к капле и ждут, когда кровь равномерно распределится по шлифу. Затем быстрым движением шлифованного стекла справа налево покрывают предметное стекло тонким равномерным слоем крови (рис. 20). Для получения хорошего мазка предметное стекло должно быть достаточно обезжирено, слегка подогрето, шлиф должен равномерно касаться его поверхности, масса крови должна быть равномерно распределена, без перерывов и пустот. Полученный мазок высушивают на воздухе или в термостате (37 °С). Высушенный препарат погружают на 3-5 мин в метиловый спирт, окрашивают по Романовскому и вновь сушат.

Окрашенный мазок помещают под микроскоп для анализа элементов красной крови. Во время микроскопирования мазков обращают внимание на следующие изменения:

— Наличие дегенеративных форм эритроцитов: анизоцитоз – характеризуется разной величиной элементов красной крови – наличием макро — и микроцитов; пойкилоцитоз — изменения формы эритроцитов (звездчатые, овальные, грушевидные, серповидные); анизохромия — появление слабоокрашенных (гипохромных) и сильноокрашенных (гиперхромных) эритроцитов; эритроциты с кольцами Кебота; эритроциты с тельцами Жолли.

— Изменения количества клеток физиологической регенерации: увеличение полихроматофильных эритроцитов (полихромазия — множественность цветовой окраски); увеличение числа ретикулоцитов (специальная суправитальная окраска); появление нормобластов (нормобластоз).

— Наличие клеток патологической регенерации: мегалобласты оксифильные; мегалобласты полихроматофильные; мегалоциты.

Результаты, полученные при анализе крови, взятой от разных животных (здоровых и гипотрофиков) несколькими студентами, обобщают и обсуждают.

Оформление протокола опыта. Кратко описывают способ получения и окраски мазка крови. Зарисовывают найденные патологические формы эритроцитов. Сопоставляют морфологическую картину элементов красной крови у здоровых поросят и поросят-гипотрофиков.

Метки: