Цель занятия: Изучить артериальную и венозную гиперемии, их причины, механизм развития и последствия.
Задание 1. Нейротоническую артериальную гиперемию.
Оснащение: микроскопы; пенопластовые препаровальные дощечки; кюветы; булавки; анатомические пинцеты; нитки (1 катушка); вата; 10%-ный раствор этилового спирта (300 мл); раствор Рингера для холоднокровных (50 мл); подопытные животные: лягушки.
Постановка опыта. Лягушку, наркотизированную этанолом, фиксируют таким образом, чтобы край нижней челюсти был расположен у отверстия препаровальной дощечки. Осторожно извлекают язык и крепят его, косо прикалывая булавками к подлежащей пластинке. Убедившись в том, что на языке отсутствуют кровоизлияния и он равномерно и легко растянут, у его корня находят язычный нерв. Этот нерв проходит в составе нервно-сосудистого пучка, который можно легко обнаружить при оттягивании слизистой оболочки снаружи. Под нерв подводят нитку с помощью тонкой круглой хирургической иглы, которую осторожно вкалывают между нервом и кровеносными сосудами.
После описанной подготовки препарат языка лягушки помещают на предметный столик микроскопа. Просматривают в проходящем свете исходное состояние микроциркуляторного русла выбранного участка языка. Отмечают диаметр артериальных сосудов и капилляров, скорость кровотока. Помощник экспериментатора (второй студент) механически раздражает язычный нерв легким натяжением и перемещением (взад-вперед) лигатуры.
Уже в момент раздражения и в последующие несколько минут возникают усиленный кровоток, расширение артерий, увеличение числа функционирующих капилляров.
Оформление протокола опыта. В тетради кратко записывают методику проведения опыта, зарисовывают микроциркуляторное русло языка лягушки в исходном состоянии и после раздражения язычного нерва. Зафиксированные изменения анализируют. Делают выводы.
Задание 2. Венозная гиперемия языка лягушки.
Оснащение: пенопластовые препаровальные дощечки, микроскопы; булавки, нитки (1 катушка), кюветы, 10%-ный раствор этилового спирта (300 мл), подопытные животные лягушки.
Постановка опыта. Лягушку, наркотизированную алкоголем, кладут на препаровальную дощечку, брюшком вниз. Открывают рот, фиксируют нижнюю челюсть у края круглого отверстия, а затем вколами булавок закрепляют конечности. Приподняв верхнюю челюсть, осторожно извлекают язык, расправляют его над отверстием и фиксируют в заданном положении косо вколотыми булавками. Одной булавкой поднимают верхнюю челюсть. Визуально по обе стороны языка отыскивают вены, идущие в составе сосудисто-нервных пучков. Вены лежат латеральнее артерий отличаются от них темно-красным цветом и большим диаметром. Пинцетом захватывают и оттягивают у корня край языка, вкалывают иглу между артерией и веной, выше отходящих от нее анастомозов, и подводят лигатуры поочередно под оба венозных ствола. Подготовив препарат, помещают его на предметный столик микроскопа. Выбирают участок языка с наиболее видимой картиной кровотока, находят венозные сосуды, где кровь из мелких протоков направляется в более крупные. Изучают в избранном поле зрения микроскопическую картину кровотока. С помощью ранее подведенной лигатуры аккуратно перевязывают один из венозных стволов языка. Видимых расстройств кровообращения не наступает.
Завязывают лигатуру, подведенную и ко второй вене (но так, чтобы ее можно было потом развязать!). Обнаруживают, что по артериям кровь продолжает поступать в капилляры и вены, они переполняются, расширяются, кровоток вначале резко замедляется, а потом вовсе прекращается. Наблюдают маятникообразные движения крови: во время систолы желудочка кровь по артериям продвигается вперед, во время диастолы — назад. Число сосудов увеличено, они расширены, изогнуты. Капилляры и вены переполнены форменными элементами, кровоток прекращается — стаз. При визуальном осмотре языка отмечают его отечность, синюшную окраску.
Проследив все фазы развития венозной гиперемии, устраняют ее причину — развязывают обе лигатуры, наложенные на вены у корня языка. Наблюдают обратную последовательность в восстановлении кровотока. Снова появляется маятникообразное движение крови в сосудах, причем колебания становятся все больше, по отдельным капиллярам кровь начинает двигаться непрерывно, этот процесс распространяется на все большее число сосудов, и вскоре кровоток в артериях, капиллярах и венах полностью восстанавливается. Исчезает цианотичность языка.
Оформление протокола опыта. Отмечают характер кровообращения в тканях языка в исходном состоянии, после перевязки одной вены, второй вены, динамику восстановления кровотока после устранения причины, вызвавшей венозную гиперемию. Анализируют результаты эксперимента. Делают выводы.
Задание 3. Обтурационная ишемия сосудов языка лягушки.
Оснащение: препаровальные дощечки; кюветы; булавки; микроскопы; круглые хирургические иглы); нитки; пинцеты анатомические; пипетки; 10%-ный раствор этилового спирта (300 мл); раствор Рингера для холоднокровных (70 мл); подопытные животные: лягушки.
Постановка опыта. Лягушку, наркотизированную алкоголем, помещают на препаровальную дощечку брюшком вниз. У края круглого отверстия булавками фиксируют нижнюю челюсть и прикладывают к дощечке конечности лягушки. Осторожно извлекают язык, расправляют и закрепляют его над отверстием. У корня языка отыскивают артерии, которые проходят вместе с нервом медиальнее язычной вены. Оттягивают пинцетом край языка и сначала под одну, а затем под другую артерию подводят лигатуры с помощью круглой иглы, избегая захвата нервных стволов. Препарат помещают на предметный столик микроскопа, лучше стереоскопического, над осветительным прибором. Изучают кровообращение в артериальной сосудистой сети. Перевязывают сначала одну язычную артерию, но так, чтобы в последующем можно было легко развязать узел. Следят за состоянием кровотока, но особых расстройств кровоснабжения не обнаруживают. Затем таким же образом перевязывают и вторичную язычную артерию.
Выявляют сразу же возникающие изменения кровотока. Мелкие артерии постепенно запустевают, капилляры становятся малозаметны, кровообращение скоро совсем прекращается. Обращают внимание на кровоток, сохраняющийся в отдельных мелких сосудах за счет коллатералей. При визуальном осмотре обнаруживают резкое побледнение тканей языка.
Констатировав развившуюся ишемию, поочередно развязывают узлы нитей, которыми были перевязаны артерии. Следят за динамикой восстановления кровоснабжения тканей языка.
Оформление протокола опыта. Записывают динамику изменений кровотока, характерную для ишемии. Описывают последовательность восстановления кровообращения после устранения причины патологического процесса.
Задание 4. Истинный стаз в сосудах брыжейки лягушки.
Оснащение: препаровальные дощечки; микроскопы; ножницы глазные; булавки; кюветы, пинцеты анатомические, пипетки глазные, 10%-ный раствор этилового спирта (300 мл); 2%-ный раствор натрия хлорида
(30 мл); раствор Рингера для холоднокровных (100 мл); подопытные животные: лягушки.
Постановка опыта. Наркотизированную лягушку кладут на препаровальную дощечку и фиксируют конечности. Делают боковой разрез кожи и мышц брюшной стенки. Извлекают тонкий отдел кишечника, аккуратно расправляют брыжейку над отверстием в дощечке, фиксируя стенку кишки косо вклотыми булавками.
Препарат размещают на столике микроскопа и убеждаются в том, что кровообращениение в брыжейке не нарушено. Подбирают участок с хорошо развитой капиллярной сетью, наносят на него 2-3 капли гипертонического (2%-ного) раствора натрия хлорида.
Наблюдают за последующим изменением характера кровотока и расположением форменных элементов в капиллярах. Передвижение форменных элементов крови в сосудах, особенно в капиллярах, замедляется. Эритроциты склеиваются, образуются конгломераты, затрудняющие кровоток. Повышается периферическое сопротивление. Возникают признаки венозного застоя. Увеличивается проницаемость стенки капилляров. Развивается стаз, для которого наиболее характерна агрегация форменных элементов крови.
После этого серозную оболочку брыжейки многократно отмывают раствором Рингера. Проводя наблюдения, обнаруживают медленный распад конгломератов и восстановление кровотока в капиллярной сети и более крупных сосудах брыжейки.
Оформление протокола опыта. Зарисовывают микроскопическую картину истинного капиллярного стаза. Отмечают последовательность восстановления кровотока после устранения химического фактора, вызвавшего стаз. Делают выводы о причинах и последствиях стаза.
Цель занятия: Изучить эмболию и тромбоз, их причины, виды, механизм тромбообразования, последствия.
Задание 1. Микроскопическая картина развития жировой эмболии в сосудах различных органов лягушки.
Оснащение: препаровальные дощечки; кюветы; микроскопы; препаровальные иглы; глазные ножницы; пинцеты анатомические; булавки; шелковые нитки (1 моток); стеклянные канюли; покровные стекла; 10%-ный раствор этилового спирта (300 мл); вазелиновое масло, окрашенное Суданом (70 мл); раствор Рингера для холоднокровных (130 мл); подопытные животные: лягушки.
Постановка опыта. Группу студентов присутствующих на занятиях разбивают на три подгруппы, одной поручают подготовить препарат языка лягушки, другой — легкого, третьей — препарат лапки лягушки.
В первом случае Лягушку, наркотизированную этанолом, помещают на препаровальную дощечку брюшком вверх. Верхнюю челюсть фиксируют у края отверстия в дощечке двумя вколотыми булавками. Булавками прикалывают также конечности. Срезают лоскут кожи над грудиной, приподнимают ее препаровальной иглой, ножницами удаляют мышцы и часть грудной кости, расположенной над сердцем. Через образовавшееся отверстие получают доступ к перикарду, рассекают его и обнажают сердце. После этого лягушке приоткрывают рот, осторожно извлекают язык, расправляют его над отверстием, прикрепляют по краям булавками, не прижимая ткань языка к поверхности дощечки, сохранив тем самым кровоток.
Поместив препарат на предметный столик стереоскопического или обычного микроскопа, наблюдают под малым увеличением картину кровотока. По характеру движения крови находят артерии и вены. Набирают в шприц заранее приготовленную эмульсию вазелинового масла в физиологическом растворе, пальцем или пинцетом фиксируют сердце и в полость желудочка, проколов его сверху, вводят 0,2 мл вазелинового масла, окрашенного суданом в красный цвет. Сразу же начинают следить за появлением первых жировых эмболов в кровеносных сосудах (рис. 16). Наблюдают за конфигурацией жировых капелек. Сначала их мало, они круглые, затем, по мере накопления, жир принимает контуры капилляра, мелких и более крупных артерий. Нарушается кровоток. Характер этих нарушений зависит от величины, вида, количества частично или полностью закупоренных сосудов.
Рис. 16. Эмболия сосудов малого и большого кругов кровообращения:
1 — эмболия сосудов мозга; 2 — эмболия легочных сосудов; 3 — эмболия воротной вены; 4 — эмболия артерий кишечника; 5 — эмболия паразитарного происхождения (личинки паразитов); 6 — воздушная (инъекционная) эмболия; 7 — тромбоэмболия; 8 — эмболия клетками злокачественной опухоли; 9 — метастах опухоли; жировая эмболия (травмы трубчатых костей)
В отдельных участках заметны перераспределение кровотока, появление коллатерального кровообращения.
Во втором случае Наркотизированную лягушку помещают на стеклянной пластинке брюшком вверх. Фиксируют в заданном положении, привязывая лапки толстыми нитками. В трахею через голосовую щель вводят стеклянную канюлю с резинкой и зажимом на конце. В последовательности, описанной выше, обнажают сердце. Боковым разрезом вскрывают грудобрюшную стенку, слегка раздувают легкое, очень осторожно выводят его наружу через операционный разрез. Препарат помещают под объектив микроскопа. Под малым увеличением рассматривают микроскопическую картину легочного кровообращения подопытной лягушки. В полость желудочка сердца вводят эмульсию окрашенного вазелинового масла.
Изучают динамику развития жировой эмболии сосудов малого круга кровообращения. Обращают внимание на множественность анастомозов, по которым осуществляется кровоснабжение ткани легкого при закупорке даже сравнительно крупных магистралей.
В третьем случае Наркотизированную лягушку фиксируют на препаровальной дощечке брюшком вверх с таким расчетом, чтобы можно было проследить за кровотоком в плавательной перепонке одной из задних лапок. С этой целью перепонку слегка растягивают и фиксируют косо вколотыми булавками над соответствующим отверстием. В том же порядке, как было описано выше, обнажают сердце и вводят в полость его желудочка жировую эмульсию. В токе артериальной крови сразу же обнаруживают круглые жировые частицы, с разной скоростью продвигающиеся по сосудам. По мере увеличения количества шариков они начинают закупоривать капилляры, артериолы, а затем и более крупные артериальные сосуды, принимая их формы.
Готовя одновременно три препарата, студенты группы, переходя во время занятий от одного препарата к другому, знакомятся с развитием эмболии в различных органах, отличающихся морфологическими особенностями кровоснабжения.
Оформление протокола опыта. Записывают использованную методику. Зарисовывают схему расположения эмболов в сосудах языка, легкого, плавательной перепонки. Анализируют возможные расстройства кровоснабжения в различных тканях. Делают выводы о последствиях эмболии.
Задание 2. Изучить некоторые механизмы тромбообразования.
Опыт 1. Моделирование образования красного, коагуляционного тромба в сосудах языка лягушки.
Оснащение: препаровальные дощечки; микроскопы; булавки; натрия хлорид (7 г); препаровальные иглы; 10%-ный раствор этилового спирта (300 мл); подопытные животные: лягушки.
Постановка опыта. Лягушку, наркотизированную алкоголем, помещают на препаровальную дощечку. Фиксируют голову и конечности, над отверстием расправляют язык и укрепляют его булавками. Зафиксированную лягушку помещают на предметный столик обычного или стереоскопического микроскопа. В поле зрения находят вену с медленным током крови. Рядом с помощью препаровальной иглы размещают маленький кристаллик натрия хлорида. Изучают микроскопическую картину образования красного тромба. Вскоре после действия химического повреждающего фактора у внутренней стенки всей вены начинают выпадать и склеиваться форменные элементы крови. Постепенно на большом участке образуется белый веретенообразный тромб, состоящий из лейкоцитов и тромбоцитов. Затем появляются нити фибрина, которые задерживают эритроциты по всей длине тромбической массы. У края тромба по направлению тока крови хорошо видны вихревые потоки плазмы и различных форменных элементов. Здесь образуется хвостовая часть тромба, от которой могут отрываться и уноситься током крови частицы тромба, которые становятся эмболами.
Оформление протокола опыта. Зарисовывают микроскопическую картину тромбоза сосуда. Объясняют механизм образования красного коагуляционного тромба. Делают выводы.